一、基本信息英文全称Big Endothelin-1 (1-39) (porcine)中文全称猪源全长大内皮素 11–39 肽释义Big Endothelin-1 为内皮素 1 无活性前体全长多肽猪源序列共 39 个氨基酸经内皮素转化酶 ECE 剪切生成成熟活性 ET-1。三字母序列Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp-Val-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Ile-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-Ser-Pro-Ser-Arg-Ser单字母序列CSCSSLMDKECVYFCHLDIIWVNTP EHIVPTYGLGSP SRS氨基酸总数39 aa分子式C193H293N49O58S5分子量4388.05结构修饰说明线性全长前体肽无 N 端生物素、无焦谷氨酸、无 C 端酰胺修饰两组分子内二硫键内皮素家族特征双环结构Cys¹ ↔ Cys¹⁵Cys³ ↔ Cys¹¹双二硫键维持 N 端环区天然折叠是 ECE 高效识别底物的必要构象3.22–39 位为 ECE 酶切识别羧基端区段对应猪 Big ET-1 底物功能区4.含 Met 残基为人源 Big ET-1 (1-38) 不存在的易氧化位点。结构式二、理化性质1.紫外定量含 Trp、Tyr、Phe280 nm 紫外吸收显著可紫外分光光度法定量2.稳定性要点4 个 Cys 构成双二硫环体系严禁 DTT、β-ME 等还原剂否则环结构断裂、多肽完全失活含 Met极易氧化失活溶解、分装全程冰浴、缩短敞口接触空气长期冻干粉需充氮气隔氧保存Trp、Tyr、Phe 均为强光敏芳香残基配液、储存全程避光无末端封闭修饰N、C 两端易被氨肽酶、羧肽酶及 ECE 降解工作液必须现配现用3.电荷特性酸性残基Asp、Glu碱性残基Lys、His、Arg整体偏弱酸性适配 pH 6.0–7.4 PBS、猪血管内皮、肺动脉平滑肌、猪血浆缓冲体系4.溶解性Ser、Thr、Asn 亲水残基丰富搭配带电氨基酸中性 PBS 常温可完全溶解5.空间构象N 端 1–15 位依靠两组二硫键形成双环刚性骨架22–39 位柔性区段为 ECE 特异性结合与切割位点双环结构调控酶切效率。三、生物学背景猪 Big ET-1 (1-39) 是猪内皮素前体原剪切生成的全长前体自身无强缩血管活性内皮素转化酶 ECE 在 21 位 Ile 与 22 位 Val 之间切断肽键释放成熟 ET-1ET-1 结合 ETₐ/ETᵦ受体介导强效血管收缩、平滑肌增殖。仅适用于猪心血管、肺循环相关体外实验与人源 Big ET-1 序列存在多处物种差异。四、生物学功能作为 ECE 天然全长底物体外酶切产生活性 ET-1诱导血管收缩、血管重构、肺动脉高压、肾脏损伤N 端双环结构维持多肽正确折叠保障 ECE 识别与催化效率参与猪心血管稳态、肺循环、肾脏微循环相关病理调控。五、科研应用猪原代肺动脉平滑肌、血管内皮细胞 ECE 酶活力检测、ECE 小分子抑制剂筛选Pull-down 实验探究 ECE 与猪源 Big ET-1 全长前体的蛋白相互作用猪高血压、肺动脉高压、血管纤维化体外细胞模型人 / 猪 Big ET-1 全长前体序列、酶切效率、受体效应跨物种对比研究全长 Big ET-1 与截短体 (22-39) 对照研究 N 端双环对 ECE 催化活性的调控机制。六、溶解与储存规范溶解pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制全程禁用还原剂缩短敞口时间防止 Met 氧化、二硫键断裂冻干粉短期 - 20 ℃避光密封长期分装充氮气隔氧-80 ℃避光储存工作液单次分装避免反复冻融2~8 ℃避光存放不超过 3 天酶活检测实验现配现用。